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                                                1. 今天是2019年10月22日 星期二,歡迎光臨本站 上海唯地生物技術有限公司 網址: www.rwus.icu

                                                  大腸桿菌轉化

                                                  轉化后大量長菌,呈長融的態勢

                                                  文字:[大][中][小] 2015-9-28    瀏覽次數:1474    

                                                  連接產物轉化后大量長菌,完全是一種長融的態勢,在轉化前感受態DH5αAmp+,Kan+中都未能搖起來,說明感受態沒有被污染,這是為什么?


                                                  答:每次實驗中都應設有陽性對照以估計轉化效率,設立陰性對照已消除可能的污染及查明失敗的原因。出現上述情況,可能是菌量過多或者感受態細胞在操作過程中污染。請先確定不加DNA只有感受態細胞的陰性對照是否在抗性板上生長,以排除操作過程中抗生素失效或被有抗生素的菌株污染的情況;其次請轉化酶切后的質粒作為另一個陰性對照,確定酶切是否完全。對于菌量過多的問題,就大多數克隆實驗來說,50μl感受態已綽綽有余,如出現大片長融的狀態,請適當減少感受態用量或涂板菌量。



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