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                                                1. 今天是2019年5月24日 星期五,欢迎光临本站 上海唯地生物技术有限公司 网址: www.rwus.icu

                                                  新品推荐

                                                  MC1061F-

                                                  文字:[大][中][小] 2017-10-24    浏览?#38382;?b class="red">1359    

                                                   MC1061F- Chemically Competent Cell 产品说明书 




                                                  产品规格(CAT#: DL1095)

                                                  MC1061F-:                                               100μl/支

                                                  pUC19 (control vector,10pg/μl):                   10μl

                                                  保存条件(保质期):                            -80℃(6个月) 


                                                  基因型

                                                  araD139 Δ (araA-leu)7697 Δ(lac)X74 galK16 galE15(GalS) lambda- e14- mcrA0 relA1 rpsL150

                                                  (StrR) spoT1 mcrB1 hsdR2


                                                  产品说明

                                                  MC1061F-菌株来源于E.coli B/r型SB3118菌株,同时也是DH10b及TOP10的母本菌株。MC1061F-化转感受态细胞转化效率极高,可用作实验室的常规质粒构建及噬菌体展示实验,但缺乏F`因子,不能用于丝状噬菌体(比如M13)的感染。不含核酸酶endA1突变,体内核酸酶含量?#32454;擼?#25552;取质粒时务必使用质粒提取试剂盒中去蛋白液尽量去除核酸酶对质粒的污染。?#21496;?#26666;具有链霉素抗性。唯地生物生产的MC1061F-感受态细胞经特殊工艺制作,pUC19质粒检测转化效率>2×109 cfu/μg DNA。


                                                  操作方法

                                                  1. MC1061F-感受态细胞从-80℃拿出,?#26438;?#25554;入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用?#26893;?#25171;EP管底轻轻混匀(避免?#20204;?#21560;打),冰中静置25分钟。

                                                  2. 42℃水浴热激45秒,?#26438;?#25918;回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。

                                                  3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm?#27492;?0分钟。

                                                  4. 5000 rpm离心1分钟收集菌体,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。

                                                  5. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少15 h。


                                                  注意事项

                                                  1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化。插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。

                                                  2. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物?#19978;?#24212;减少最终用于涂板的菌量。




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                                                  MC1061F- Chemically Competent Cell 产品说明书

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